Hemoglobinopathieën diagnostiek (hematologie en DNA onderzoek)
OMIM: 141800 (HBA1) en 141850 (HBA2), 141900 (HBB), 142000 (HBD), 142200 en 142250 (HBG1 en HBG2)
Bepaling/Indicatie | Technieken |
Hematologische parameters | Micros ES60 |
Hb Scheiding:
|
|
Zink Protoporphyrin (ZPP) | AVIV hematofluometer |
Haptoglobine (Hp) | Immunodiffusie (Mancini test) met NOR Partigen Plate |
Inclusion bodies | Brilliant Cresyl Blue staining en microscopische beoordeling |
Sikkelceltest | Meta-bisulfiet methode en microscopische beoordeling |
Erythromorfologie | Microscopische beoordeling bloeduitstrijk |
Gen | Technieken |
HBA1 + HBA2 (alfa1- en alfa2-globine) |
|
HBB (beta-globine) |
|
HBD (delta-globine) |
|
HBG1 + HBG2 (A-gamma en G-gamma globine) |
|
Procedure:
Specieel onderzoek
Standaard wordt bepaling hematologische parameters uitgevoerd, inclusief Hb scheiding en GAP PCR voor de 9 meest voorkomende alfa-thalassemie deleties.
Indien op basis van een verhoogde HbA2 of HbF een beta- of delta-beta-thalassemie wordt vermoed volgt DNA analyse voor het beta-globine gen en/of MLPA van het beta-globine gencluster. Dit vervolgonderzoek wordt apart in rekening gebracht.
Indien er verdenking bestaat op HbS of andere Hb varianten volgt een DNA analyse ter bevestiging en karakterisering van deze Hb variant.
Indien moleculaire analyse geen afwijkingen laat zien, terwijl de verdenking op HbP dragerschap blijft bestaan (microcytair hypochroom bloedbeeld, bij verhoogd aantal erythrocyten-aantal en normale ZPP) volgt deletie-onderzoek met MLPA.
Spoedonderzoek voor HbS i.v.m. narcose
Hb scheiding en sikkelceltest.
Spoedonderzoek i.v.m. zwangerschap potentiële risicoparen
Zelfde bepalingen als bij specieel onderzoek, het resultaat wordt zo snel mogelijk gecommuniceerd.
Detectie ratio:
Met de combinatie hematologie, biochemische scheiding Hb fracties, screening voor de meest voorkomende deleties d.m.v. gap-PCR gevolgd door direct sequencing van de globine genen (exonen, intronen en 5’en 3 ‘UTR) en MLPA van de alfa- en beta-globine genen <99%
Gen | Gen Product | Locus | Overerving | OMIM nummer | Referentie sequentie |
HBA1 | alfa1-globine | Chr 16p13.3 | autosomaal recessief | 141800 | NM_000558.3 |
HBA2 | alfa2-globine | Chr 16p13.3 | autosomaal recessief | 141850 | NM_000517.4 |
HBB | beta-globine | Chr 11p15.4 | autosomaal recessief | 141900 | NM_000518.4 |
HBD | delta-globine | Chr 11p15.4 | autosomaal recessief | 142000 | NM_000519.3 |
HBG1 | A-gamma-globine | Chr 11p15.4 | autosomaal recessief | 142200 | NM_000559.2 |
HBG2 | G-gamma-globine | Chr 11p15.4 | autosomaal recessief | 142250 | NM_000559.2 |
Website links:
Uitslagtermijnen laboratoriumonderzoek
Databases / links:
HbVAR: globin.bx.psu.edu/cgi-bin/hbvar/counter
Literatuur: www.emqn.org/emqn/Best+Practice